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乐鱼我国团队阐释细胞增殖示踪技术ProTracer的建立及应用—新闻—科学网

发布日期:2024-04-13 14:11:47 访问量:53 来源:乐鱼智能

6月2日,国际学术期刊Nature Protocols 于线揭晓了中国科学院份子细胞科学卓着立异中央周斌研究组、西湖年夜学何灵娟研究组互助的研究结果“Genetic recording of in vivo cell proliferation by ProTracer”。该研究体系论述了细胞增殖示踪技能——ProTracer的构建及运用,并以肝细胞增殖的示踪为例,具体地先容了怎样哄骗ProTracer技能示踪成体哺乳植物于器官稳态与修复再生历程中的细胞增殖。

细胞增殖是多种构造器官发育、稳态维持及修复再生历程中细胞来历的根蒂根基。体内细胞增殖因为细胞类型和所处的期间差别存于较年夜差异。此前,范畴内较为经常使用的检测细胞增殖的要领重要分为三类,别离是:细胞增殖标记物染色、核苷酸近似物掺入和同位素掺入。上述要领对于在检测体内细胞增殖都具备必然的局限性:细胞增殖标记物染色要领只能检测某个刹时的细胞增殖状况,核苷酸近似物可以举行永劫程的掺入可是具备必然的细胞毒性,同位素掺入的检测要领比力繁杂、未便捷。此外,上述检测要领都没法做到细胞类型特同性的细胞增殖检测,当目的细胞的增殖速度较为迟缓时,哄骗上述检测要领就轻易呈现目的细胞的增殖旌旗灯号被其它增殖速度较快的细胞增殖旌旗灯号滋扰或者沉没的问题。为相识决上述问题,周斌研究组近来成立了可以或许示踪体内细胞增殖的遗传示踪技能——Proliferation Tracer (ProTracer),该技能实现了多个方面的冲破,包孕于体内永劫间不间断地示踪细胞增殖,实现了细胞类型特同性的细胞增殖检测和活体检测细胞增殖等。

该事情具体描写了使用ProTracer技能举行细胞增殖示踪的技能细节,包孕小鼠品系的构建、鉴定、交配计谋和细胞增殖示踪的终极检测要领。为了实现体内无漏洞捕获细胞增殖,研究职员构建了一个可被引诱酿成Cre的CreER小鼠品系:Ki67-Cre-rox-ER-rox (Ki67-CrexER ),此中rox是Dre同源重组酶的辨认位点。当将Ki67-CrexER 小鼠与特定的DreER小鼠联合后,DreER可以或许于Tamoxifen引诱后入核并辨认Ki67-CrexER 中的rox位点,并发生Dre-rox同源重组反映将位在两个rox位点之间的ER序列切割失,从而于DreER表达的细胞中将引诱性表达的Ki67-CrexER 改变为连续性表达的Ki67-Cre ,实现时空可控和细胞特同性的细胞增殖的不间断捕获。此外,联合荧光素酶陈诉基因,ProTracer技能也能够实现终身无创检����APP测活体植物内特定细胞类型的增殖,无需正法植物。

该事情以成体小鼠肝脏作为示例,具体描写了对于成年小鼠构造中细胞增殖的示踪,此中包罗了小鼠交配计谋、tamoxifen引诱计谋、小鼠毁伤模子和构造样天职析等。研究职员哄骗ProTracer技能研究了肝脏于成体构造稳态及毁伤再生中的肝细胞增殖,并量化了肝脏稳态和毁伤状况下的新生肝细胞数目,发明了肝细胞增殖的区域性富集征象,展现了成体肝脏中新生肝细胞的重要来历。该事情的揭晓为范畴内使用ProTracer技能研究特定细胞类型的体内增殖示踪提供了便当。

份子细胞卓着中央周斌研究组玻士后刘秀秀以及玻士生翁文栋为该论文配合第一作者,份子细胞卓着中央周斌研究员、西湖年夜学何灵娟研究员为该论文配合通信作者。感激份子细胞卓着中央植物平台以及细胞平台的鼎力大举撑持,感激中国科学院、基金委、科技部、上海科委等部分的经费撑持。

文章链接:https://www.nature.com/articles/s41596-023-00833-8

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